
Partie théorique (1/2 jour)
• Stratégie d'expression (choix système et vecteur)
• Stratégie de clonage
• Outils de modification et mutagénèse
Partie pratique (4 jours 1/2)
Construction d’un vecteur d'expression de l’EGFP chez E. coli.
• Préparation des fragments par PCR
• Ligation dans le vecteur
• Transformation bactérienne par électroporation
• PCR sur colonies
• Tests d’expression en culture 30 ml
• Électrophorèse SDS-PAGE
Construction d’un variant de l’EGFP par mutagénèse dirigée
•...
Partie théorique (1/2 jour)
• Stratégie d'expression (choix système et vecteur)
• Stratégie de clonage
• Outils de modification et mutagénèse
Partie pratique (4 jours 1/2)
Construction d’un vecteur d'expression de l’EGFP chez E. coli.
• Préparation des fragments par PCR
• Ligation dans le vecteur
• Transformation bactérienne par électroporation
• PCR sur colonies
• Tests d’expression en culture 30 ml
• Électrophorèse SDS-PAGE
Construction d’un variant de l’EGFP par mutagénèse dirigée
• Mutagénèse dirigée par PCR à extrémités recouvrantes
Prise en charge C2P dans le cadre des actions collectives. Contacter votre correspondant C2P.
Wilfrid DIERYCK : maître de conférences à l’École nationale supérieure de technologie des biomolécules de Bordeaux (ENSTBB) - Institut polytechnique de Bordeaux. Responsable de l’enseignement de Génie Génétique au sein de l’ENSTBB. Ses activités de recherche sont axées sur la production de protéines recombinantes.
Méthode F2
Vidéoprojection du support PowerPoint.
Alternance d’exposés, de discussions avec le formateur et entre participants.
Nombreux cas pratiques et mises en situation opérationnelles dans les laboratoires de l’ENSTBB à Bordeaux.
Remise d’une documentation pédagogique.